Utilisation du microscope à balayage AQUILOS 2 de la société THERMO F~

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Title: Utilisation du microscope à balayage AQUILOS 2 de la société THERMO FISHER
Légende: L'équipement en fonctionnement dans cette vidéo est le microscope à balayage AQUILOS 2 de la société THERMO FISHER.
Cet équipement (unique en France en 2023) permet de faire des lamelles extrêmement fines à partir de divers types d'échantillon, à l'aide d'un faisceau d'ion de Gallium, tout en combinant l'observation du processus à l'aide d'un faisceau d'électron.
Le processus affiché dans la vidéo représente une découpe de cellule en direct à partir d'un échantillon refroidit à température cryogénique (-190°C).
L'échantillon en question a été préparé à partir de cellules cultivées sur une grille de microscope électronique (3mm de diamètre), et qui a été congelé dans l'éthane liquide, puis stocké dans l'azote liquide.
Unit - Laboratory: Plate-forme Technologique Nanoimagerie
Signature: Stéphane Tachon
Created Date: 2023
Credit: Institut Pasteur/Stéphane Tachon
L'écran est divisé en 4:
- partie supérieure gauche : une image (statique) de la position d'intérêt avec le faisceau d'électron (pour localiser les cibles)

- partie supérieure droite : on peut voir une image de la même position avec le faisceau d'ion, mais avec un angle d'attaque différent pour venir creuser dans la cellule.
Au début, on voit les deux tranchées latérales qui permettent à la lamelle de subir moins de contrainte mécanique lorsqu'elle sera affinée. Puis deux rectangles viennent se dessiner et sont continuellement balayés par le faisceau d'ion, qui va creuser au-dessus et au-dessous de la lamelle.

- partie inférieure gauche : il s'agit d'une photographie de l'échantillon vue de haut sur son support et sur la platine de déplacement motorisée.

- partie inférieure droite : il s'agit d'une vue en caméra vidéo de l'intérieur de la chambre du microscope avec l'échantillon et les divers composants du système.

La vidéo ne montre que le début du procédé qui réclame un certain temps avant de pouvoir finaliser une lamelle de moins de 200 nanomètres d'épaisseur. Cette technique de préparation d'échantillon permet d'étudier les structures et organismes à l'extérieur comme à l'intérieur des cellules, qu'elles soient infectées ou non. La congélation cryogénique, en corrélation avec un faisceau de particules pour la découpe, permet de garantir l'intégrité des structures à observer.
Une autre possibilité qu'offre cette machine est de venir prélever un morceau d'échantillon comme un tissu, à l'aide l'une pointe ultrafine et de l'amener à adhérer sur une demi-grille de microscope électronique, pour ensuite l'affiner et l'observer : c'est la technique dite du cryo lift out (encore très expérimentale à ce stade).
Keywords: Electron cryomicroscopy, Video
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